|
|
Optimalizace metod izolace a analýzy beta-glukanů produkovaných karotenogenními kvasinkami
Šimková, Eva ; Márová, Ivana (oponent) ; Szotkowski, Martin (vedoucí práce)
Cílem této diplomové práce byla optimalizace metod izolace a analýzy polysacharidů -glukanů produkovaných karotenogenními kvasinkami. V rámci experimentu byla vybrána jako produkční kmen kvasinka Rhodotorula toruloides, která byla kultivována v laboratorních bioreaktorech. V teoretické části je vypracována literární rešerše na téma karotenogenní kvasinky a metabolity, které produkují. Hlavním metabolitem, kterým se tato práce zabývá, je polysacharid -glukan. -glukany jsou polysacharidy, které tvoří v buňce kvasinky buněčnou stěnu. Jsou známy pro své imunostimulační účinky, antioxidační účinky, podporují hojení ran a pomáhají ke snížení hladiny cholesterolu a glukózy v krvi. Experimentální část práce se zabývá kultivací kvasinkové biomasy, její charakterizací. Dále optimalizací enzymatického stanovení -glukanů pomocí komerčního enzymatického kitu a izolacemi -glukanů z kvasinkové biomasy. V rámci experimentu byly také dále vyvíjeny metody extrakce kvasinkové biomasy umožňující z malého vzorku kvasinkové biomasy jedním extrakčním postupem vyseparovat a analyzovat -glukany, lipidy, lipidické látky a proteiny.
|
|
|
Zavedení spektrofotometrického stanovení citrátů a oxalátů v moči do rutinního provozu klinické laboratoře
FEJT, Martin
Stanovení hladiny citrátů a oxalátů v moči má velký význam při diagnostice a následném monitorování pacientů s urolitiázou. Údaje o koncentraci těchto látek v moči spolu s dalšími metabolickými vyšetřeními pomáhají určit pravděpodobnost recidivy urolitiázy. Současně pomáhají lékařům k nalezení vhodných režimových opatření pro pacienty s touto chorobou. Tato bakalářská práce se zabývá zavedením stanovení citrátů a oxalátů do rutinního provozu klinické laboratoře. V teoretické části je nejprve stručně popsána problematika urolitiázy, její rozdělení, etiopatogeneze, léčba a profylaxe. Důraz je kladen na úlohu citrátů a oxalátů. Dále jsou charakterizovány jednotlivé druhy močových konkrementů a možnosti jejich analýzy. Následuje přiblížení procesu verifikace měřicího postupu a s ní spojených výkonnostních parametrů. Jsou zde též vyjmenovány a popsány související analytické vlastnosti metod. V rámci popisu zaváděcího procesu je stručně vysvětleno nastavení parametrů v laboratorním a nemocničním informačním systému. V laboratoři ÚKBH FN Plzeň jsme pro stanovení koncentrace citrátů a oxalátů v moči zvolili enzymatické metody a automatický analyzátor Beckman Coulter AU480. Teoretická část bakalářské práce tedy pokračuje popisem spektrofotometrie a fungování použitého přístroje. Vyzkoušeli jsme reagencie od zahraničních výrobců INstruchemie (Holandsko) a LTA (Itálie). Následuje vysvětlení principů metod od výše uvedených výrobců, ve stručnosti jsou uvedeny další možné způsoby stanovení těchto analytů. Pro rutinní použití byly vybrány reagencie od firmy INstruchemie. Jelikož tento výrobce již své metody na spektrofotometrech firmy Beckman Coulter validoval, proběhla na ÚKBH pouze jejich verifikace. Praktická část této bakalářské práce se zabývá nejprve přípravou reagencií k analýze a pokračuje naprogramováním parametrů jednotlivých metod do analyzátoru. Hlavní náplní této práce je zevrubný popis provedení jednotlivých fází analýz, jež jsou vyžadovány verifikačním procesem. Po úspěšném dokončení všech měření a vyhodnocení jejich výsledků byly vypracovány příslušné verifikační protokoly a metody uvedeny do rutinního provozu laboratoře.
|
host ::
RSS.